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ELISA樣本處理及要求

樣本處理及要求 ：
1. 血清 ： 室溫血液自然凝固 10-20 分鐘 ， 離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。 仔細收集上
清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離 心
20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細收集上清，保存過程
中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清 ： 檢測分泌性的成份時 ， 用無菌管收集 。 離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉(zhuǎn) /
分 ） 。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右 。 通過反復凍融 ， 以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份 。 離心 20 分
鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5.組織標本 ： 切割標本后 ， 稱取重量 。 加入一定量的 PBS ， PH7.4 。 用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標本融化后仍然保持 2-8 ℃ 的溫度。加入一定量的 PBS （ PH7.4 ） ，用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分 ） 。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測，其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗，可 將標本放于 -20 ℃ 保存，但 應 避免反復凍融 .
7.不能檢測含 NaN3 的樣品 ，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（ HRP ）活性