豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血清白蛋白(HSA)的豬脂蛋白α,ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利,往往還更加。
ELISA試劑盒可用目測(cè)定性,也可用酶標(biāo)測(cè)定儀測(cè)定光密度(OD)值以反映抗原含量,靈敏度可達(dá)每毫升納克(ng)水平甚至皮克(Pg)水平。常用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)等。豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒如何選擇?
現(xiàn)在市面上的豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢?首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測(cè)的分子進(jìn)行檢測(cè),除此以外也還有一些需要加以考量的因素。
1. 抗體類型:單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA,實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如,對(duì)于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測(cè)有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測(cè)擁有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測(cè)抗體(不論多抗還是單抗)的配對(duì)很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測(cè)抗體競爭抗原上的同一位點(diǎn),為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測(cè)抗體所識(shí)別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間發(fā)生了沖突,就會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。要避免這一問題,我們可以選擇購買“matched pair”的捕獲/檢測(cè)抗體對(duì),這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗(yàn)證才推薦的好組合。
通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn),雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。不過有時(shí)候雙抗夾心法并不是*選擇,例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著,又或者抗體只有一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下,競爭性ELISA就更為適用,這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競爭,以結(jié)合捕獲抗體。
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