胰島素ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
什么是胰島素?
胰島素是由胰臟內的胰島β細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體內降低血糖的激素,同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。外源性胰島素主要用來治療糖尿病。
胰島素的生物合成速度受血漿葡萄糖濃度的影響,當血糖濃度升高時,β細胞中胰島素原含量增加,胰島素合成加速。
胰島素在胰島β細胞中合成。胰島素的分子量5700,由兩條氨基酸肽鏈組成。A鏈有21個氨基酸,B鏈有30個氨基酸。A-B鏈之間有兩處二硫鍵相連。
胰島素ELISA試劑盒操作注意事項:
1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶溶解后再使用。
2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3、濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;預處理后的樣本無需稀釋,直接取50μL加樣即可。
4、嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5、所有液體組分使用前充分搖勻。
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